Визуализация адгезии CHO-клеток на носителе с помощью химерного белка TibP-PDGFR

Более 20 лет CHO-клетки используются в качестве линии клеток млекопитающих для получения рекомбинантных терапевтических белков. Общей чертой в развитии новых продуктов и биоподобий является использование новых технологий, которые включают в себя быстрый и эффективный отбор стабильных клеточных клонов.

Направление работы: Клеточная биология

Авторы работы: ГБОУ Школа № 17

Предметы: Биология

Классы: 10 класс

Мероприятия: Открытая городская научно-практическая конференция «Наука для жизни» 4−5 апреля 2018 г.

Руководитель(и) работы: ведущий инженер Воробьёва И.Г., учитель биологии Авнет Н.М.

В работе используется адгезия – сцепление поверхностей разнородных тел. Она обусловлена межмолекулярными взаимодействиями. Плазмидная ДНК − самовоспроизводящаяся кольцевая молекула, используемая для внесения чужеродных генов в интересующую нас клетку. Плазмиды участвуют в компенсировании тех или иных дефектов метаболизма. Для проверки возможности селекции трансфицированных CHO-s клеток с помощью адгезии на твёрдом носителе мы внесли в клетку плазмидную ДНК, содержащую химерный белок TiBP-PDGFR и последовательность, кодирующую целевой белок, в данном случае − модельный белок EYFP. Химерный белок TiBP-PDGFR состоит из части, которая закреплена на клеточной мембране, и части, которая связывается с носителем. Клетки, получившие плазмидную ДНК, демонстрировали способность связываться с носителем – титановым кольцом. Скопления светящихся благодаря EYFP-белку клеток мы наблюдали на титановых кольцах, что не наблюдалось в контрольных образцах без химерного белка. Показанный эффект может быть основой отбора генетически изменённых клеток от исходных, не получивших плазмидную ДНК клеток.